一、液相色譜系統(tǒng)的固定相

常用化學(xué)鍵合相的種類和性質(zhì)

（1）非極性鍵合相：十八烷基硅烷鍵合相是常用的非極性鍵合相。非極性鍵合相通常用于反相色譜。

 

（2）弱極性鍵合相：可作為正相或反相色譜的固定相，視流動(dòng)相的極性而定。

 

（3）極性鍵合相：一般都用作正相色譜的固定相。氰基鍵合相和氨基鍵合相是常用的極性鍵合相。氨基鍵合相不宜分離帶羰基的物質(zhì)，流動(dòng)相中也不得含有羰基化合物。使用硅膠基質(zhì)的化學(xué)鍵合相時(shí)流動(dòng)相中水相的pH應(yīng)維持在2-8，否則會(huì)引起硅膠溶解。

其他種類的固定相

手性固定相（CSP）：分為蛋白類CSP、多糖CSP、環(huán)糊精CSP、π-氫鍵型CSP、大環(huán)抗生素類CSP、配體交換CSP

 

二、山東液相色譜系統(tǒng)的流動(dòng)相

HPLC對(duì)流動(dòng)相的基本要求：

(1)化學(xué)穩(wěn)定性好，不與固定相發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。

(2)對(duì)試樣有適宜的溶解度。要求k在1-10范圍內(nèi)，在2-5的范圍內(nèi)。

(3)必須與檢測(cè)器相適應(yīng)。例如用紫外檢測(cè)器時(shí)，只能選用截止波長(zhǎng)小于檢測(cè)波長(zhǎng)的溶劑(4)純度要高，黏度要低。低黏度流動(dòng)相如甲醇、乙腈可以降低柱壓，提高柱效。

流動(dòng)相對(duì)分離的影響

 

在HPLC中，n由固定相及色譜柱填充質(zhì)量決定，α主要受溶劑種類的影響，k受溶劑配比的影響。增加流動(dòng)相中強(qiáng)溶劑的比例，其洗脫能力增強(qiáng)，使k變小。

溶劑的強(qiáng)度和選擇性。